制胶流程(以一块0.75/1.0/1.5mm的mini胶为例)

• 步骤1:

  取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液，各2.0/2.7/4.0mL，混匀；

• 步骤2:

  向步骤1的混合溶液中加入40/60/80μL的改良型促凝剂，混匀；
  注意：加入改良型促凝剂后，需轻柔混匀，防止过多氧气混入胶溶液，抑制凝胶聚合。

• 步骤3:

  将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可(注意：此溶液为过量，请勿全部注入， 可留少许于配胶杯中，以判断胶凝固状况)，加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上；

• 步骤4:

  待下层胶凝固后(约15min)，倒去上层水或醇；
  注意：当水(醇)和胶之间有一条折射线时，说明胶已凝固。

• 步骤5:

  取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液，各0.5/0.75/1.0mL，混匀；
  注意：由于染料的特殊理化性质，使用前请摇匀。

• 步骤6:

  向步骤5的混合溶液中加入10/15/20μL的改良型促凝剂 ，混匀；
  注意：加入改良型促凝剂后，需轻柔混匀，防止过多氧气混入胶溶液，抑制凝胶聚合。

• 步骤7:

  将步骤6的混合溶液注入制胶玻璃板中，插入梳齿；

• 步骤8:

  待上层胶凝固后(约10~15 min)，拔去梳齿即可用于电泳。
  注意：请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。

下层胶配方

凝胶厚度下层胶溶液下层胶缓冲液改良型促凝剂

0.75mm2.0mL2.0mL40μL

1.00mm2.7mL2.7mL60μL

1.50mm4.0mL4.0mL80μL

上层胶配方

凝胶厚度上层胶溶液上层胶缓冲液改良型促凝剂

0.75mm0.5mL0.5mL10μL

1.00mm0.75mL0.75mL15μL

1.50mm1.0mL1.0mL20μL