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概述

谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是基因工程重组蛋白设计和表达过程中一种常用的融合标签。重组蛋白与GST融合后, 不仅稳定性提高、可溶性增强, 而且为下游的分离纯化带来了极大的方便。GST分子量约为26 kDa, 与还原型谷胱甘肽(GSH)有极强的亲和力, 因此可以利用固定化的GSH实现对GST融合蛋白的一步亲和纯化。

特点

1.特异性好、与GST融合蛋白亲和力高,从细菌破碎液中经一步亲和纯化即可得到纯度超过95%的目标蛋白; 2.结合在介质上的GST融合蛋白,可被溶液中高浓度的还原型谷胱甘肽(GSH)(33 mM)竞争性洗脱。对不同的GST融合蛋白来说,无需摸索最佳的GSH洗脱浓度,使介质的使用更加简单; 3.可再生并反复使用。

应用

用于分离纯化带有GST标签的可溶性重组蛋白,溶解于高浓度变性剂的包涵体蛋白不能用这种介质纯化。

组分

5 ml (1/5/10 columns)

适用样本

GST标签融合蛋白

属性

注意事项 GST标签蛋白需保持活性,否则无法与填料相结合,填料不可冻存。
保存缓冲液 20%乙醇
运输条件 冰袋运输
树脂类型 4%琼脂糖
树脂容量 5 ml (1/5/10 columns)
分子量 约26 kDa
载量 约5~10 mg GST标签蛋白/1 ml
粒径范围 45-165 μm
pH 稳定性(长期) 4~10
pH 稳定性(短期) 3~12
化学稳定性 常用的水相缓冲液; 1 mol/L 氢氧化钠; 1 mol/L 醋酸钠; 6 mol/L 盐酸胍
物理稳定性 基质耐热(pH7水中,30min,120°C)
最大压力 0.3 MPa, 3 bar
最大线性流速 300 cm/h
推荐流速 0.01 Mpa/cm柱高,20 - 40 cm/h
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